组织工程角膜体外构建的关键技术

      组织工程角膜体外构建的关键，一是获得足量且属性正常的人角膜种子细胞，二是制备出与种子细胞具有理想生物相容性的载体支架，三是建立组织工程角膜的体外构建技术。

体外培养的角膜种子细胞：

      现有研究所用的种子细胞，主要有癌基因转染的永生化人角膜细胞，胚胎或多能干细胞定向分化的人角膜细胞，人体非角膜组织细胞，兔等动物角膜组织细胞，以及非转染人角膜组织细胞等。

      由于永生化人角膜细胞具有潜在的致瘤风险、人角膜细胞定向分化用的干细胞体外增殖能力有限、人体非角膜组织细胞的生物相容性欠佳、动物角膜组织细胞存在伦理问题，因此，非转染人角膜组织细胞是目前组织工程角膜体外构建的理想种子细胞。

体外制备的载体支架：

      现有研究涉及的载体支架主要分为人工合成材料、生物蛋白聚合材料、生物蛋白复合材料以及脱细胞生物角膜组织几大类。

      由于人工合成材料的生物相容性不足、生物蛋白聚合材料的机械性能欠佳、生物蛋白复合材料的生物相容性欠佳以及人角膜组织来源有限等问题，因此，脱细胞动物角膜组织是目前组织工程角膜体外构建的理想载体支架。

组织工程角膜的体外构建：

      各国学者经过多年努力，使用不同的角膜种子细胞和载体支架并利用多种培养液、信号分子和体外构建技术，分别体外构建出了多种组织工程角膜制品，取得了诸多重要进展，部分学者也开展了动物移植试验。

      虽然所构建出的组织工程角膜越来越接近天然角膜，但动物角膜移植的效果还不够理想。其中，以非转染人角膜组织细胞为种子细胞、以脱细胞动物组织为载体支架所体外构建的组织工程角膜内皮等，在结构和功能上与天然角膜最为相似，为高仿真角膜替代物的体外构建、开发和临床应用创造了条件。